A cadeia polissacarídica do antígeno O conecta-se com a região central do lipídio A na superfície periplasmática da membrana celular para formar uma molécula de lipopolissacarídeo completa. A transferência de moléculas de lipopolissacarídeos do espaço periplasmático para a membrana externa, mas o mecanismo de sua apresentação na membrana externa ainda não está claro. Especula-se que pode ser alcançado através da "ponte de Bayer" nos locais de fixação das membranas interna e externa.

Waal (Rfal) é a única enzima conhecida por estar relacionada com a reação do ligante. Waal pode efetivamente conectar polímeros de grande peso molecular relativo ou oligômeros de pequeno peso molecular relativo à região central do lipídio A. A característica básica da reação de ligação é que ela é conservativa e não depende da via de síntese do antígeno O. O antígeno O sintetizado por diferentes bactérias através de diferentes maneiras pode ser efetivamente conectado e expresso na superfície celular, que também é a base para a pesquisa e expressão do antígeno O heterólogo da cepa de engenharia genética Escherichia coli K-12.

A estrutura primária de Escherichia coli K-12 e Salmonella typhimurium Waal não tem semelhança óbvia. Embora ambos contenham múltiplos domínios transmembranares, seus perfis hidrofóbicos são obviamente semelhantes, mas suas funções não podem ser complementares. A atividade efetiva de cada enzima Waal pode exigir a coordenação de Waak (ou seja, Rfak), indicando que a modificação específica da estrutura do núcleo ou (e) a interação específica entre Waal e a proteína Waak pode ser necessária para a atividade de cada enzima Waal. Na superfície celular, o antígeno O pode existir apenas na forma de ligação com o núcleo do lipídio A (como Salmonella typhimurium), ou na forma de ligação com ou sem o núcleo do lipídeo A. Este último é representado pelo antígeno O do Vibrio cholerae O139. Existe apenas um oligossacarídeo curto (unidade de repetição única) conectado ao núcleo, e o polissacarídeo capsular com um grande peso molecular relativo (não conectado ao núcleo) contém a mesma estrutura de unidade de repetição.